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International Journal of Morphology

On-line version ISSN 0717-9502

Abstract

SALINAS, Paulo; PEZO, Felipe; SANCHEZ, Raúl  and  RISOPATRON, Jennie. Validación de SYBR-14 y 6-CFDA para Evaluar la Viabilidad e Integridad de la Membrana Plasmática en Espermatozoides Caninos de Raza Chihuahua. Int. J. Morphol. [online]. 2014, vol.32, n.1, pp.16-21. ISSN 0717-9502.  http://dx.doi.org/10.4067/S0717-95022014000100003.

En la aplicación de técnicas reproductivas es importante determinar in vitro la capacidad fecundante de los espermatozoides, para ello se utilizan combinaciones de tinciones para evaluar los diferentes parámetros de función espermática, aumentando así la precisión de la estimación de la muestra. El objetivo del estudio fue comparar la efectividad de la utilización de los fluorocromos 6-CFDA y SYBR-14 combinados con PI para determinar la viabilidad e integridad de la membrana plasmática por citometría de flujo. Se utilizó semen fresco de caninos (n=5) de raza Chihuahua, con una concentración espermática >150x106 esp/ml y motilidad progresiva >80%. Tres protocolos fueron ensayados: grupo 1: SYBR-14/PI, grupo 2: 6-CFDA/PI y grupo 3: PI. La integridad de la membrana plasmática de los espermatozoides fue similar entre grupos 1 y 2, independiente del fluorocromo utilizado (37,26±13,9 y 33,8±14,6, respectivamente; p=0,4601). Asimismo, la viabilidad espermática entre los grupos 1, 2 y 3 (62,7±13,9, 66,1±14,6 y 66,4±13,3, respectivamente; p=0,8987). En conclusión, no se evidenció diferencias en la efectividad para determinar la viabilidad e integridad de la membrana plasmática mediante la utilización de SYBR-14 y 6-CFDA, ambas tinciones pueden ser incorporadas al análisis de rutina de semen canino de raza Chihuahua.

Keywords : Caninos; Chihuahua; Semen; Espermatozoides; SYBR-14; 6-CFDA; Citometría de flujo.

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