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Revista chilena de infectología

versão impressa ISSN 0716-1018

Rev. chil. infectol. v.17 n.4 Santiago  2000

http://dx.doi.org/10.4067/S0716-10182000000400007 

Aislamiento de Acinetobacter spp. desde muestras
clínicas en el Hospital Clínico Regional
"Guillermo Grant Benavente", Concepción

MARIANA DOMINGUEZ Y., BQ1, MARCELA SEPULVEDA A., BQ, HELIA BELLO T., BQ1, GERARDO GONZALEZ R., LB (1), SERGIO MELLA M (1) y RAUL ZEMELMAN Z, QF.(2)

ISOLATION OF Acinetobacter spp. FROM CLINICAL SPECIMENS AT
THE HOSPITAL CLINICO REGIONAL "GUILLERMO GRANT
BENAVENTE", CONCEPCION

Since Acinetobacter has become an important nosocomial pathogen, the aim of this study was to investigate the different species of this genus involved in infections in the main hospital of the city of Concepción between August 1998 and December 1999. One hundred-thirteen Acinetobacter strains were isolated mainly from respiratory tract and wound secretions. The majority of isolates came from intensive care unit patients, followed by patients hospitalized in trauma and surgery services. Strains were identified at species level and Acinetobacter baumannii isolates were biotyped using phenotypic tests. A. baumannii was the most frequent species found, and biotypes 9, 6 and 8 predominated in this nosocomial center.
Key words: Acinetobacter; Phenotypic typing; Hospital infections.

INTRODUCCION

Acinetobacter ha surgido como un importante microorganismo a nivel intrahospitalario involucrado en la colonización e infección de pacientes, principalmente, con inmunidad disminuida.1-3 Uno de los mayores problemas de las infecciones producidas por esta bacteria es su tratamiento, por su amplia multiresistencia son pocas las alternativas terapéuticas disponibles en la actualidad.4, 5

La taxonomía de este género bacteriano ha sufrido grandes cambios, es así que hasta el año 1986 sólo se reconocía la especie Acinetobacter calcoaceticus con las variedades anitratus y lwoffi.6 Posteriormente, los avances logrados en los estudios genéticos han permitido establecer la existencia de al menos 19 genoespecies de Acinetobacter,7-9 la mayoría de las cuales pueden ser diferenciadas mediante pruebas fenotípicas.7, 9, 10 La especie más frecuentemente asociada, tanto a casos esporádicos como a brotes epidémicos, es Acinetobacter baumannii.2 Dentro de esta especie también se ha encontrado una gran diversidad, es así que se describen 19 biotipos los cuales se diferencian a través de su capacidad de utilizar cinco compuestos como única fuente de carbono.11

Puesto que en Chile ha aumentado la frecuencia de aislamiento de Acinetobacter spp. en centros hospitalarios,12, 13 se efectuó este estudio con el objetivo de conocer las diferentes especies de Acinetobacter y los biotipos de A. baumannii aisladas de muestras clínicas de pacientes internados en el Hospital Clínico Regional de Concepción.

MATERIAL Y METODO

Cepas bacterianas. El estudio se realizó con 113 cepas de Acinetobacter spp. aisladas en el Laboratorio de Microbiología del Hospital "Guillermo Grant Benavente" de Concepción entre agosto de 1998 y diciembre de 1999. Las cepas fueron mantenidas a -70 ºC en una mezcla de caldo tripticasa/glicerol (2:1) para su posterior ensayo en el Laboratorio de Antibióticos del Departamento de Microbiología de la Universidad de Concepción.

Identificación y biotipificación de las cepas. La identificación de especies y la biotipificación de las cepas de A. baumannii se realizó mediante pruebas fenotípicas, de acuerdo al esquema propuesto por Bouvet y Grimont.11 Se estudió la capacidad de crecimiento a 37, 41 y 44 ºC (en caldo infusión cerebro corazón (GIBCO)), oxidación de glucosa, hidrólisis de gelatina y utilización de compuestos como única fuente de carbono. Las pruebas se realizaron a 30ºC incubando 48 horas, excepto la utilización de fuentes de carbono para la cual se empleó incubación hasta 6 días. Se incluyó como controles las cepas de A. baumannii ATCC 19606, Acinetobacter haemolyticus ATCC 17906 y Acinetobacter lwoffii NCTC 5866.

RESULTADOS

En el período incluido en el estudio se aisló Acinetobacter spp. a partir de muestras clínicas provenientes de 12 servicios del Hospital Clínico Regional (Tabla 1). La mayor frecuencia de aislamiento (31,8%) se obtuvo en la unidad de cuidados intensivos (UCI), seguido de las secciones de cirugía y traumatología (14,1%). Las fuentes de origen de las cepas fueron diversas y el mayor número de ellas se recuperó desde muestras provenientes de secreciones de heridas y de tracto respiratorio, con frecuencias de 42,5 y 41,5%, respectivamente (Tabla 2).


Tabla 1. Distribución de cepas de Acinetobacter
spp. aisladas de diferentes servicios del
Hospital Clínico Regional, Concepción

Servicio n %

UCI adultos 360 31,80
Traumatología 160 14,10
Cirugía 160 14,10
Medicina 9 8,0
Quemados 6 5,3
Neonatología 6 5,3
Otorrinolaringología 3 2,7
UCI Pediátrica 2 1,8
UTI 2 1,8
Urología 2 1,8
Endocrinología 1 0,9
No registrado 130 11,50
     
Total 11300 100,000
     
UCI: unidad de cuidados intensivos. UTI: unidad de
tratamientos intermedios.


Tabla 2. Fuente de origen de las cepas de Acinetobacter spp. aisladas
entre agosto de 1998 y diciembre de 1999 en el
Hospital Clínico Regional, Concepción

Fuente de aislamiento n Frecuencia de aislamiento (%)

Herida 480 42,50
Tracto respiratorio 470 41,50
Sangre 3 2,6
Catéter 2 1,8
Líquido peritoneal 2 1,8
Drenaje 2 1,8
Secreción ótica 1 0,9
Desconocido 8 7,1
     
Total 11300 100,000

De las 113 cepas aisladas, se encontró que 108 cepas correspondieron a A. baumannii (95,5%), 3 cepas a Acinetobacter genoespecie 3 (2,7%) y una cepa a A. haemolyticus (0,9%). Sólo una cepa no pudo ser identificada como especie mediante el esquema empleado.

Los biotipos de A. baumannii y su distribución en las diferentes secciones del Hospital Clínico Regional se muestran en la Tabla 3. Se detectó 8 de los 19 biotipos descritos, con predominio del biotipo 9 (44,4%), seguido de los biotipos 6 (26,0%), 8 (13,0%) y 16 (9,3%). Los biotipos restantes se aislaron con frecuencias inferiores a 4%. A. baumannii biotipo 9 fue prevalente en UCI (17/48), en cambio el biotipo 8 fue más frecuente en la sección de traumatología (6/14). Las cepas pertenecientes al biotipo 6 se distribuyeron igualmente en estas dos secciones (8/28).


Tabla 3. Distribución de biotipos de Acinetobacter baumannii en los diferentes servicios del
Hospital Clínico Regional, Concepción

 

Biotipos

 

n (%) de cepas

Servicio 1 2 5 6

8

9 12 16 Total

UCI adultos

2 0 1 8 2 17 0 5 35
Traumatología 1 0 0 8 6 0 0 0 15
Cirugía 1 0 0 5 2 4 1 3 16
Medicina 0 0 0 1 1 5 0 0 7
Quemados 0 0 0 0 1 4 0 1 6
Neonatología 0 0 0 0 1 4 0 1 6
ORL 0 0 0 2 0 1 0 0 3
UCI Pediátrica 0 0 0 0 0 2 0 0 2
UTI 0 1 0 0 1 0 0 0 2
Urología 0 0 1 0 0 0 0 0 1
Endocrinología 0 0 0 0 0 1 0 0 1
Pensionado 0 0 0 1 0 0 0 0 1
No registrado 0 0 0 3 0 10 0 0 13
                   

Total

4 1 2 28 14 48 1 10 108
  (3,7) (0,9) (1,8)

(26,0)

(13,0) (44,4) (0,9) (9,3) (100)
                   

UCI: unidad de cuidados intensivos. UTI: unidad de tratamientos intermedios. ORL: otorrinolaringología.


DISCUSION

Los estudios de hibridación ADN-ADN desarrollados en las últimas décadas han permitido evidenciar una gran diversidad de genoespecies dentro del género Acinetobacter.7, 9 Junto a estas técnicas genéticas se han diseñados esquemas de identificación sobre la base de propiedades fenotípicas que han permitido diferenciar la mayoría de estas especies.7, 11 Uno de los problemas se presenta con la diferenciación de las especies 1, 2, 3 (BG)7 y 13 de Tjernberg y Ursing (14 BG),8,9 lo que ha llevado a proponer la denominación complejo A. calcoaceticus - A. baumanni para referirse a ellas.10 Una de las pruebas importantes es el crecimiento a 44ºC, considerado, en un comienzo, indicativo de A. baumannii; se ha demostrado que es dependiente del medio de cultivo, logrando una mejor discriminación de las especies al emplear caldo infusión cerebro corazón en lugar de caldo tripticasa,10 como fue propuesto por Bouvet y Grimont.7 En nuestro estudio la caracterización de las cepas mediante propiedades fenotípicas, y utilizando caldo infusión cerebro corazón, permitió identificar casi la totalidad de las cepas aisladas; no logrando hacerlo en tan sólo una de ellas.

La especie prevalente fue A. baumannii, lo que concuerda con lo encontrado en el extranjero3 y en estudios previos realizados en Chile.14, 15 Claramente el mayor número de aislamientos se originó de pacientes internados en UCI, principalmente desde muestras de secreción de tracto respiratorio. Son precisamente estos pacientes los que tienen mayor predisposición a ser colonizados o infectados por este patógeno oportunista debido a los diferentes procedimientos médicos a que están sometidos.1, 2 Por otra parte, en los pacientes hospitalizados en los servicios de traumatología y cirugía, el principal problema por Acinetobacter fue la infección de heridas.

Entre las cepas de A. baumannii se encontró un claro predominio del biotipo 9. Hallazgos similares se han informado previamente en Chile, en centros hospitalarios de Santiago, Talca y Concepción.15, 16 Sin embargo, la frecuencia de aislamiento de este biotipo disminuyó del orden de 60 a 44,4%. Además, se pudo apreciar un incremento de las cepas del biotipo 6, las cuales anteriormente no sobrepasaban el 5 a 10% de los aislamientos,15, 16 excepto en hospitales de Valparaíso y Temuco,15 Este hecho podría estar sugiriendo la presencia de un brote por cepas de este biotipo, en el Hospital Regional de Concepción, ya que se aislaron mayormente desde los servicios de UCI y traumatología.

Los principales biotipos que circulan en los hospitales chilenos difieren de lo que se ha encontrado en algunos centros nosocomiales de Europa.11, 17 En Latinoamérica es poca la información disponible a este respecto, en Argentina se comunica como prevalente el biotipo 2,18 el cual se encuentra raramente en Chile.

Es de importancia poder conocer la distribución de A. baumannii en centros hospitalarios y realizar estudios conducentes a clarificar su reservorio y vías de transmisión dentro del ambiente hospitalario. La biotipificación es uno de los métodos que ofrece una ayuda en este sentido. El conocer mejor la epidemiología de las infecciones intrahospitalarias producidas por este microorganismo permitiría un mejor control de ellas y, de esta manera, se podría disminuir el gran problema que se presenta con su tratamiento. Actualmente A. baumannii muestra uno de los patrones de resistencia más amplios e incluso, recientemente, se ha demostrado que las cepas chilenas han aumentado considerablemente su resistencia a la combinación ampicilina-sulbactam en los últimos años,19 quedando pocas alternativas terapéuticas para combatir este microorganismo.

RESUMEN

Debido a que Acinetobacter se ha transformado en un importante patógeno intrahospitalario el objetivo de este estudio fue investigar las especies de este género que se encontraban involucradas en procesos infecciosos en el principal centro hospitalario de la ciudad de Concepción, en el periodo comprendido entre agosto de 1998 y diciembre de 1999. Se recolectaron 113 cepas de Acinetobacter, aisladas principalmente de secreciones del tracto respiratorio y heridas. El mayor número de aislamientos tuvo su origen en pacientes internados en la unidad de cuidado intensivo, seguido de pacientes que se encontraban en los servicios de traumatología y cirugía. La identificación de especie y la biotipificación de Acinetobacter baumannii se realizó mediante pruebas fenotípicas. A. baumannii fue la especie predominante, siendo los biotipos 9, 6 y 8 los prevalentes en este centro hospitalario.

Laboratorio de Antibióticos, Departamento de Microbiología, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad de Concepción.
1 Magister en Microbiología
2 Diplomado Bacteriology. MSc. Public Health .
Trabajo financiado por Proyecto FONDECYT 1970848

Correspondencia a:
Mariana Domínguez Y.
Departamento de Microbiología
Facultad de Ciencias Biológicas,
Universidad de Concepción
Casilla: 160-C. Concepción
Tel: 41-203237; Fax: 41-245975
e-mail: mdomingu@udec.cl

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