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International Journal of Morphology

versión On-line ISSN 0717-9502

Int. J. Morphol. v.25 n.3 Temuco sep. 2007

http://dx.doi.org/10.4067/S0717-95022007000300014 

 

Int. J. Morphol., 25(3):557-560, 2007.

 

Estudio Estereológico del Hígado de Cobayo (Cavia porcellus)

Stereological Study of the Guinea-pig Liver (Cavia porcellus)

 

*Carlos Rosas C.; **Bélgica Vásquez & *Mariano del Sol

* Facultad de Medicina, Universidad de La Frontera, Temuco, Chile.
** Universidad Autónoma de Chile, Temuco, Chile

Dirección para correspondencia


SUMMARY: The liver is a widely researched organ for having an infinity of functions. On the other hand, Stereologyallows the access of quantitaive data of the study´s structure. Having access to this tpe of date of hepatocitos and sinusoids Under normal physiological conditions, it is necessary to determine how the number of these cells varies in pathological conditions. The principal objective of this investigation was to describe the morphology of the liver of cobayo, through Stereology, setting the bases for future morphofuncional investigations. Five adult males of the Cavia porcellus species were used, of which the liver was extracted and its volume determined, applying the Scherle method. Subsequently five pieces of aleatoria form were obtained which were set in an aqueous Bouin solution. Of these samples 3µm cuts were obtained, that were dyed with hematoxilina-eosina. For the stereological study the M42 system was used. The following were determined: the number densities, volume and surface and total number of hepatocitos and sinusoides. An index of lesser significance or equal to 0,05. The NV of hepatocitos was9.20 x 105 /mm3, VV de 70.04% and SV of 254.95 mm2/mm3. In the case of the sinusoides NV was 1.94 x 105 /mm3, VV of 24.86% and SV de 47.01 mm2/mm3. The total number of hepatocites was of 2.8 x 107 and sinusoides 0.61 x 107. While comparing the results obtained in Cavia porcellus and those obtained in other species, a quantitative variation in the hepatic morphology is observed. With these results it is possible to establish the bases for experimental research .

KEY WORDS: Liver; Guinea pig; Cavia porcellus; Stereology.

RESUMEN: El hígado es un órgano ampliamente investigado por la infinidad de funciones que posee. Por otra parte, la Estereología permite obtener datos cuantitativos de la estructura en estudio. Tener acceso a este tipo de datos de los hepatocitos y sinusoides en condiciones fisiológicas normales, es necesario para determinar como varía el número de estas células en condiciones patológicas. El objetivo principal de esta investigación fue describir la morfología del hígado de cobayo a través de la Estereología, sentando las bases para futuras investigaciones morfofuncionales. Se utilizaron 5 machos adultos de la especie Cavia porcellus, a los cuales se les extrajo el hígado y se determinó su volumen aplicando el método de Scherle. Posteriormente, se obtuvieron 5 trozos de forma aleatoria, los que fueron fijados en solución de Bouin acuoso. De estas muestras se obtuvieron cortes de 3µm, que fueron teñidos con hematoxilina-eosina. Para el estudio estereológico, se usó el sistema M42. Fueron determinados: las densidades de número, volumen y superficie y número total de hepatocitos y sinusoides. Se consideró un índice de significancia menor o igual a 0,05. El NV de hepatocitos fue de 9,20 x 105 /mm3, VV de 70,04% y el SV de 254,95 mm2/mm3. En el caso de los sinusoides el NV fue de 1,94 x 105 /mm3, VV de 24,86% y el SV de 47,01 mm2/mm3. El número total de hepatocitos fue de 2,8 x 107 y sinusoides 0,61 x 107. Al comparar los resultados obtenidos en Cavia porcellus y los obtenidos en otras especies, se observa una variación cuantitativa en la morfología hepática. Con estos resultados es posible establecer bases para investigaciones experimentales.

PALABRAS CLAVE: Hígado; Cobayo; Cavia porcellus; Estereología.


INTRODUCCIÓN

El hígado, ocupa un importante papel en la homeostasis del organismo a través de una innumerable cantidad de funciones que realiza. Del punto de vista clínico, es importante detectar alteraciones morfológicas de este órgano para corroborar la existencia de alguna patología. Así, el conocimiento de esta estructura, en especial sus aspectos celulares cuantitativos, resulta fundamental para comprender si el órgano está normal o alterado. Es aquí donde la Estereología juega un rol importante, ya que permite realizar una reconstrucción tridimensional y una estimación cuantitativa de estructuras a nivel microscópico.

Si bien es cierto, se han realizado numerosos estudios del hígado de varias especies, en los cuales se ha analizado la acción de diversos agentes, hay pocos en la especie Cavia porcellus.

En relación al número de hepatocitos, se han encontrado diferencias notables entre especies. Rohr et al. (1976) determinaron un 79,3% de hepatocitos en el hígado de seres humanos; en primates Leontopithecus, Burity et al. (2004) obtuvieron 90,1- 94,9%, por otra parte; Weibel et al. (1969) informaron un 83,1%, en el hígado de ratas Wistar; y Blouin et al. (1977) un 77,8%, en el parénquima del hígado de ratas Sprague-Dawley. Por otra parte, Águila et al. (2003) en estudios experimentales en ratas, alimentadas con una dieta alta en lípidos, determinaron que el número de hepatocitos se encontraba entre 56 y 62%.

Respecto a los sinusoides hepáticos, algunos estudios morfométricos han sido realizados en diversas especies. Ragonha et al. (2006) determinaron que en el hígado de ratones, un 18,3% correspondía a sinusoides.

El objetivo del estudio, fue determinar algunos aspectos cuantitativos del hígado de cobayo (Cavia porcellus), a través de la estereología. Así, con la generación de estos nuevo conocimientos nos será posible sentar las bases para futuras investigaciones morfofuncionales.

MATERIAL Y MÉTODO

Utilizamos 5 cobayos machos adultos (Cavia porcellus), con un peso promedio de 711g (DE ± 212), sanos y mantenidos ad libitum en el Bioterio de la Universidad de La Frontera, Temuco, Chile. Los animales fueron sacrificados por traumatismo encéfalo craneano. A través de una laparotomía, fue retirado el hígado y se determinó su volumen por el método de Scherle (1970). Obtuvimos 5 trozos, aleatoriamente, siguiendo las reglas del Orientator (Mattfeldt et al.,1990). Las secciones fueron fijadas en Bouin acuoso, deshidratadas e incluidas en parafina para obtener cortes histológicos de un grosor de 3 µm (t = 3 µm), que fueron teñidos con HE. Se analizaron 5 campos por lámina, 125 campos en total. Las láminas fueron observadas en un microscopio óptico Olympus® modelo CX31, con cámara marca Moticam® modelo 480. Las imágenes fueron proyectadas en un monitor de pantalla plana marca Sony®. Para realizar la estereología se usó el test multipropósito M42.

Los parámetros estereológicos medidos fueron: densidad de volumen (VV), densidad de superficie (Sv), densidad numérica (Nv) y número total (n) de hepatocitos y sinusoides hepáticos. Se calcularon, el promedio, la desviación estándar , el error estándar, el coeficiente de variación y el coeficiente de error. Se consideró un índice de significancia menor o igual a 0,05.

RESULTADOS

El volumen promedio de los hígados de los 5 animales fue de 31,81 mm3. (DE ± 13,20). El número total de hepatocitos fue de 2,8 x 107 y de sinusoides 0,61 x 107 . Los parámetros estereológicos estudiados en hepatocitos y sinusoides se presentan en la Tabla I y las Figs. 1, 2 y 3.


Tabla I. Parámetros estereológicos del hígado de cobayo (Caviaporcellus).

Densidades promedios
DE CV (%) EE CE (%)

De número de hepatocitos

9,20x105células/mm3

±2,4 x 105

26,03

1,07 x 105

11,6

De volumen de hepatocitos

70,04%

±8,91

12,73

3,98

05,68

De superficie de hepatocitos

254,95 mm2/mm3

31,39

12,31

14,01

05,50

De número de sinusoides hepáticos

1,94 x 10 sinusoides/mm3

0,43 x 105

21,97

0,19 x105

09,81

De volumen de sinusoides hepáticos

24,86%

±3,6

20,01

1,61

06,46

De superficie de sinusoides hepáticos

47,01 mm2/mm3

10,63 mm2/mm3

22,60

4,74

10,09





DISCUSIÓN

Estudios estereológicos en el hígado de Cavia porcellus no se encuentran en la literatura consultada, siendo necesario comparar nuestros resultados con las de otras especies investigadas. El Nv de hepatocitos en cobayo es inferior al obtenido en ratas por Weibel et al. (1969), Carthew et al. (1998) y Martins et al. (2005) y superior a lo informado por Águila et al. (2003), Moreti et al. (2005); Silva et al. (2006), Marcos et al y Ragonha et al., en ratas. En el caso de los primates Leontopithecus, Burity et al. obtuvieron un Nv de hepatocitos muy superior al del cobayo.

Con respecto al VV, los valores en cobayo no son similares a los estudios realizados en otras especies. El 70,04% de hepatocitos determinado en Cavia porcellus, es significativamente inferior a lo informado por Weibel et al. (83,1% de hepatocitos) en ratas Wistar y Blouin et al. (77,8%) en el parénquima del hígado de ratas Sprague-Dawley. Por otra parte, Rohr et al. determinaron un 79,3% de hepatocitos en seres humanos; sin embargo, éstos últimos agregan que el parénquima corresponde al 92,4% del volumen del hígado. Por tanto, el VV efectivo para el hígado correspondería a un 71,89% de hepatocitos, resultado bastante similar al obtenido en nuestro estudio.

Águila et al. determinaron un VV entre 56 y 62%, en ratas que presentaban una dieta alta en lípidos, porcentaje un poco más bajo que el de nuestros resultados. Por otra parte, cuando se compara el VV de sinusoides, los resultados son bastante similares.

En el caso de los primates Leontopithecus, Burity et al. obtuvieron en todas las especies estudiadas, un VV de hepatocitos mucho mayor (90,1- 94,9%) a los obtenidos en Cavia porcellus. Estos autores hacen mención al estudio de Carrière et al. (1980) en hígado de Papio papio, quienes determinaron un VV de 84,9% de hepatocitos, resultado superior a los obtenidos en los hepatocitos de hígado de cobayo. Moreti et al. encontraron que el hígado de feto de rata Wistar presentaba hepatocitos con un 30,72% de citoplasma y un 9,47% de núcleo, resultados muy inferiores, si se comparan con el VV obtenido en los hepatocitos de cobayo. Ragonha et al. determinaron en el hígado de ratones, un 76,17% de hepatocitos y un 18,3% de sinusoides, resultados similares a los nuestros. En cambio, si comparamos los resultados con Neves et al. (2006), obtenidos en ratones Swiss Webster, estos últimos presentan VV de hepatocitos más elevado.

Se pudo comprobar que existen fluctuaciones en el número total de hepatocitos y sinusoides por cobayo estudiado, debido a que el volumen total del hígado de cada ejemplar era diferente. Sin embargo, el Nv en cada uno de ellos fue muy similar, siendo este último dato mucho más trascendental a la hora de hacer comparaciones con otras especies.

Las diferencias obtenidas en otras investigaciones podrían deberse, tanto a la diversidad de técnicas que existen para determinar los parámetros morfológicos y estereológicos, como también a los efectos producidos por los estudios experimentales, edad y condiciones medioambientales de los animales.

Con los resultados obtenidos en esta investigación se han sentado las bases para futuros estudios experimentales que se puedan realizar en el hígado del cobayo Cavia porcellus.

 

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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Dirección para correspondencia:

Prof. Dr. Mariano del Sol C.
Facultad de Medicina
Universidad de La Frontera
Casilla 54-D
Temuco - CHILE

Email: mdelsol@ufro.cl

Recibido: 22-03-2007
Aceptado: 27-07-2007

 

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